Otkrivanje higenamina u biljnim proizvodima
25.02.2025.
Higenamin (HM) je benzilizokinolinski alkaloid prvi put izoliran 1974. iz akonita (jedan od najjačih prirodnih neurotoksina i kardiotoksina, op. a. ). Dovodi do značajnog poboljšanja sportske izvedbe, ali može povećati broj otkucaja srca i izazvati kontrakciju miokarda, posebno uziman u visokim dozama.
2017. WADA je higenamin izričito navela kao agonist klase S3 β2 i zabranila njegovo korištenje u sportu. U izvješću iz 2020. o antidopinškom testiranju, WADA je pokazala da je higenamin na drugom mjestu po otkrivanju β2 agonista. Studija je otkrila da je higenamin široko rasprostranjen u kineskim biljnim lijekovima kao što su aconitum, lotosovo sjeme, herba asari i list lotosa, začini kao što su papar, sečuanski papar, cimet i lovorov list i voće cherimoya. Glavni uzrok pozitivnosti na HM kod sportaša bila je slučajna konzumacija hrane i lijekova koji sadrže HM.
Uz sve veću pozornost na kontrolu dopinga HM-om, razvijene su nove metode za otkrivanje ove tvari. Nove metode imaju i nedostatke, kao što su visoki troškovi, komplicirani koraci predprocesiranja i dugotrajna analiza.
Posljednjih godina razvijeni su imunotestovi za brzo otkrivanje HM-a. Nuntawong sa Sveučilišta Kyushu po prvi je put uspješno pripremio monoklonsko protutijelo (mAb) (S)-higenamina i razvio neizravni kompetitivni enzimski imunosorbentni test (ic-ELISA) i koloidno zlato–imunokromatografsku testnu traku (CG–ICTS) za brzo kvantitativno otkrivanje HM-a u nekim kineskim lijekovima.
Zhou sa Sveučilišta Jiangnan proizveo je vremenski razdvojenu fluorescentnu mikrosferu – imunokromatografsku test traku (TRFM–ICTS) za brzo kvantitativno određivanje HM-a u funkcionalnoj hrani. Međutim, ove metode detekcije zahtijevaju kompliciran proces pripreme uzorka.
Magnetska zrnca (MB) su vrsta nanomaterijala sa superparamagnetskim svojstvima, fleksibilnom modifikacijom, dobrom stabilnošću i disperzijom, jednostavnim rukovanjem i lakim odvajanjem. Imunomagnetske kuglice (IMB), pripremljene kovalentnim vezanjem protutijela na funkcionalne MB, mogu se koristiti za ekstrakciju analita iz matrice složenog uzorka. Mogli bi učinkovito uhvatiti specifične lijekove malih molekula i postići brzo pročišćavanje i ciljano obogaćivanje putem vanjske magnetske sile. Stoga metode predtretmana temeljene na IMB-u i imunotestovi visoke osjetljivosti imaju značajan potencijal za kombiniranu analizu tragova dopinga koji se prenosi hranom. U ovoj studiji razvijena je metoda ic-ELISA s brzim obogaćivanjem IMB-om za brzo kvantificiranje HM-a u biljnim proizvodima i ovo bi moglo biti prvi put da se identificira HM u ekstraktu mekih koralja (grass coral, engl).